Western-blot

1. Bloqueio da membrana: Mergulhe a membrana em uma solução (10 ml) PBS-T contendo 5% de Molico por 1 hora a R.T. ou O.N. a 4°C 2. Anticorpo Primário: Dilua o anticorpo primário (normalmente 1000X) em PBS-T e incube por 1-2 h com leve agitação em R.T. ou overnight a 4°C 3. Lavagem: Lave 6 vezes com PBS-T por 5 min cada lavagem 4. Anticorpo Secundário: Dilua o anticorpo secundário (10,000X- 100,000X) e incube a membrana por 1-2 h a temperatura ambiente 5. Lave com PBS-T 6 vezes com PBS-T por 5 min cada lavagem 6. Detecção: Misture volumes iguais de solução de … Continue reading Western-blot